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针刺血清对无镁诱导培养新生大鼠海马神经元内质网Ca2+ 及Caspase-12蛋白表达的影响

2018/05/03 14:29
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<p style="text-align: center;">龙学平,&nbsp; 马&nbsp; 允,&nbsp; 杨&nbsp; 帆,&nbsp; 吴&nbsp; 旭,&nbsp; 刘振邦,&nbsp; 张&nbsp; 慧</p><p style="text-align: center;">(1 安徽中医药大学,针灸骨伤临床学院,合肥 230038;2 芜湖市中医院,芜湖 241002;中国科技大学生命科学学院,合肥 230012)</p><p style="text-align: justify;"><strong>摘要</strong>:<strong>目的</strong>:观察针刺血清对无镁诱导培养新生大鼠海马神经元内质网及 Caspase-12 蛋白表达的影响。<strong>方法</strong>:&nbsp; SD 大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组。针刺组针刺取“百会”“大椎”穴,每日1次,共 7d。末次针刺后,针刺组大鼠取血清作为针刺血清,对照组取血清作为非针刺血清。以无镁诱导原代培养新生大鼠海马神经元惊厥样放电为模型,根据对培养 10d 海马神经元的不同处理分为正常细胞外液组(简称正常组)、无镁细胞外液组(简称无镁组)、针刺血清组和非针刺血清组。正常组将无血清培养液换成细胞外液培养 3h 后换液培养,其他各组用无镁细胞外液培养 3h 后换液培养。采用内质网 Ca2+特异性荧光探针结合激光共聚焦显微镜观察海马神经元内质网 Ca2+变化;采用免疫组化法观察各组不同时间段海马神经元内质网 Caspase-12 蛋白表达情况。 <strong>结果</strong>: 正常组神经元内质网可见较强荧光;无镁组 12h 和 48h 两个时间段荧光强度明显减弱(与正常组相比 p<0.05,p<0.01);针刺血清组 12h、48h 时间段内质网荧光强度显著增强(与无镁组和非针刺血清组相比 p<0.05, p<0.01)。无镁组神经元三个时间段 Caspase-12 蛋白表达均明显增加(与同时段正常组相比 P<0.05,P<0.01,P<0.01);针刺血清组 12h、48h 时间段 Caspase-12 蛋白表达减少明显(与无镁组、非针刺血清组比较 P<0.05;P<0.01)。 结论:针刺血清能稳定海马神经元内质网内 Ca2+,能显著下调海马神经元内质网 Caspase-12 蛋白表达。</p><p><strong>关键词</strong>:惊厥;&nbsp; Ca2+;&nbsp; caspase-12 蛋白;&nbsp; 内质网应激;针刺血清&nbsp; &nbsp;</p><p><br/></p>